اختبار الزهرى

موضوع: اختبار الزهرى السبت مارس 08, 2008 12:11 pm

اختبار الزهري

يستخدم هذا الاختبار للكشف عن حالات مرض الزهري.
وهناك اختبارات أولية في حالة إيجابيتها يجب عمل اختبارات تأكيديه وذلك بالكشف عن الأجسام المضادة في مصل المريض .
ونحن هنا بصدد شرح طرق الاختبارات الأولية فقط أما الاختبارات التأكيدية فهي وظيفة المعامل المتخصصة مثل معامل وزارة الصحة .
ومثال للآختبارات الأولية والتي يمكن عملها في معمل رعاية الأمومة والطفولة VDRL أو اختبار R.P.R ويوجد هناك تشابه كبير في طريقة العمل بين الاختبارين وهنا سوف نشرح طريقة إختبار VDRL
يستخدم هذا الاختبار للكشف عن الأجسام المضادة - الرياجين Antibodies Reagin الموجودة في السيرم والبلازما عند الشخص المصاب بهذا الداء .
والأنتجين عبارة عن VDRL المطور Modified VDRL وهو يحتوي علي حبيبات دقيقة من الكربون .
وهي التي تسهل رؤية النتيجة بالعين المجردة سواء كانت سالبة أو موجبة وتوضيح الفرق بينهما .

ملحوظة هامة :

لابد من حفظ المفاعيل الجاهزة الخاصة بهذا الاختبار بالثلاجة عند درجة حرارة 4 ْم – 8 ْم ولكن قبل استعمالها لابد أن تتركها خارج الثلاجة لفترة حتى تصل إلي درجة حرارة الغرفة .

وتحتوي علبة التفاعل الجاهزة علي المحاليل الآتية :

- المحلول الأول (R1) وهــــو عبارة عـــــــن الانتجين VDRL Carbon Antigen وهذا المحلول لا بد من هزه جيدا قبل الاستعمال .

- المحلول الثاني (R2) Positive Control Serum وهي العينة المتحكمة الموجبة .

- المحلول الثالث (R3) Negative Control Serum وهي العينة المتحكمة السالبة .

العينة المطلوبة :

- سيرم

- لا تستخدم العينة إذا كانت معكرة أو مدممة.

الطريقة :

بواسطة قطارة ضع نقطة واحدة من العينة داخل إحدي الدوائر الموجودة علي الشريحة الموجودة داخل العلبة .
ضع نقطة من المحلول الثاني (R2) وكذلك المحلول الثالث (R3) بنفس الطريقة كل داخل دائرة علي حدة وبواسطة قطارة منفصلة لكل دائرة .
تأكد من أن المحلول في الزجاجة الأولي (R1) متجانسا وهزها جيدا ثم ضع نقطة بواسطة قطارة نظيفة في كل دائرة من الدوائر الثلاث .
أمزج جيدا بواسطة الأعواد البلاستيك الموجـودة في العلبة - استعمل لكل دائرة عودا منفصلا .
ضع الشريحة علي جهاز هزاز ( 100 هزة في الدقيقة ) لمدة من 4 – 8 دقائق حسب التعليمات المرفقة مع المحلول .

القراءة :

النتيجــــة يمكــــن قراءتها بالعيـــــن المجردة ، قـارن بالنتيجة الموجــــــــــودة مــع (Posutive Control R2 ) وكذلك (Negative Control R3)
- وفي الحالات الموجبة (positive) تكون عبارة عن تجمعات كبيرة في الدائرة وحوافها .
In the center and periphery of test Circle))
- وفي حالة أقل ايجابية (Weakly Positive) تكون التجمعات حول حواف الدائرة فقط . (Around the Edge of test Circle)
- وفي الحالات السالبة : لا تظهر أية تجمعات علي الإطلاق .
فحص إفراز المهبل H.V.S
High Vaginal Smear
يتم أجراء هذا الفحص بعد أخذ عينة إفراز المهبل بمعرفة الطبيب المختص بواسطة مسحة قطنية معقمة ترسل للمعمل للفحص و يسجل عليها بيانات المريضة .

خطوات الفحص :
تحضر شريحة زجاجية ونضع عليها نقطتين من محلول الملح الطبيعي .
تذاب المسحة في محلول الملح جيدا .
تغطي بغطاء للشريحة وتفحص تحت المجهر بالعدسة 10X و 20 X للتأكد من وجود الأتي
أ - الصديد والدم
ب - طفيل التريكوموناس
ج - فطريات وخمائر مثل المونيليا .
4. تسجل النتيجة وترسل إلي الطبيب .

علم الخلية Cytology

علم الخلية هو أحد فروع التشخيص الطبي المعملي للأورام الذي يتعامل مع الخلايا أو رقائق الأنسجة بعد تجهيزها علي شرائح و صبغها بصبغات مناسبة ومن أشهر الصبغات المستخدمة في هذا المجال صبغة البابانيكولا وصبغة M.G.G وللحقيقة فإن فحص الخلايا طريقة ممتازة لتأكيد وجود ورم وليس لإثبات وجودة لأن بعض الأورام لا تفرز خلايا كافية للاستدلال بها .
عينات التي يتم فحص الخلايا فيها :
علي سبيل المثال البول – البصاق – الارتشاح الرئوي – سائل الاستسقاء أو مسحة عنق الرحم في السيدات ، حيث يتم فحص الخلايا التي تفرز عرضا وتتميز هذه العينات بسهولة الحصول عليها دون الحاجة لتدخل جراحي .
كما أن بعض العينات يجب ترسيبها بالسنترفيوج مثل البول وسائل الاستسقاء قبل وضعها علي الشريحة .
أما مسحة عنق الرحم فلا تحتاج إلي ترسيب بل تؤخذ مباشرة بالمسحة إلي الشريحة .
مسحة عنق الرحم

الأدوات المهمة :

يتم تجهيز شرائح زجاجية نظيفة ومسحات معقمة وكاشط ومحلول للتثبيت وعلب بلاستيك تستخدم لنقل الشرائح بسلام من مكان أخذ العينة إلي معمل الفحص – المستلزمات ، وحاليا يوجد علبة جاهزة تحتوي جميع المستلزمات المذكورة سابقا في عبوة واحدة .

خطوات العمل :
يقوم الطبيب المختص بأخذ العينة من المريضة بواسطة الكاشط أو المسحة وكتابة بيانات المريضة كاملة .
في الحال يتم فرد العينة علي شريحتين وكتابة رقم العينة وتسجيلها في سجل يومي يدون فيه البيانات .
يتم في الحال أيضا تثبيت الشرائح بوضعها في محلول مركب من كحول ايثيل 95 % + ايثير بكمية متساوية منها ولمدة من 15 – 30 دقيقة ويمكن تركها لفترة أطول في محلول التثبيت بدون أن يحدث لها أي تغيير أو إتلاف في شكل الخلايا .
كما أن من الضروري تثبيت الشرائح وهي رطبة وقبل الجفاف الكامل.
في حالة إذا ما تقرر إرسال الشرائح إلي مكان آخر للصبغة وللفحص يجب أن يكون مدة التثبيت أطول ( لمدة ساعتين ) في محلول الإيثيلي 95% + الإيثير بنسب متساوية وأن تضع الشرائح الوجه في الوجه في علب خاصة بنقل الشرائح إلي المعمل الرئيسي للصبغة .

طريقة صبغة السوائل والمسحات صبغة البابانيكولاPapanicolaou (PAP) Stain
توضع الشريحة المثبتة في كحول بتركيزات تنازلية 100% ثم 70 ثم 50% لمدة واحدة دقيقة في كل تركيز .
تغسل الشريحة في ماء مقطر.
تصبغ بصبغة هيماتوكسيلين لمدة 4 دقائق
تغسل بماء جاري لمدة 2 دقيقة
تغمر في كحول حمضي لمدة ثانية
تغسل بماء جاري لمدة 15 دقيقة
كحول 70% لمدة 2 دقيقة
كحول 95% لمدة 2 دقيقة
تصبغ بصبغة Orange G6 لمدة 2 دقيقة
تغسل بالكحول 95 % لمدة 2 ثانية
تصبغ في Eosine Azin لمدة 2 دقيقة
توضع في كحول 95 % لمدة ثواني
كحول 100% لمدة 1 ق
كحول 100 % لمدة 1 ق
زيلول لمدة 5 ق

زيلول لمدة 5 ق
ثم توضع نقطة من كندا بلسم علي الشريحة ويوضع عليها غطاء.
النتيجة
1. النواة تأخذ اللون الأزرق مع وضوح التفاصيل .
2. السيتوبلازم يأخذ اللون الأحمر في الخلايا الحامضية و يأخذ اللون الأزرق أو الأخضر المزرق في الخلايا القاعدية .
3. أما الخلايا أو رقائق الأنسجة التي تتخللها الدم فتأخذ اللون البرتقالي أو البرتقالي المخضر .
ملحوظة :
- حاليا يوجد جهاز Cyto Tek Strainer وهو جهاز صبغ اتوماتيك وتوضع به الصبغات ويقوم الجهاز بتمرير الشريحة اتوماتيك علي محاليل الصبغة حتى النهاية وتصبح الشريحة جاهزة للفحص .
كما يوجد بعض المواد التي توضع علي الشريحة بعد الصبغة للاحتفاظ بها لفترة طويلة .
1 - محاليل الصبغة
(هيماتوكسيليــــــــن Eosin-Aziure-50-Orange G6) يمكن تحضيرها من الكيماويات ويمكن شرائها جاهزة للعمل
الاختصارات الشائعة

الرمز